两种甜叶菊废渣提取物对D 渣提洗脱程序：0～10min

二、两种结果与分析

1、甜叶两种甜叶菊废渣提取物中主要成分的菊废含量

按照甜叶菊废渣提取物的主要成分为咖啡酸、绿原酸、渣提隐绿原酸、取物异绿原酸A、两种异绿原酸B、甜叶异绿原酸C、菊废槲皮素和槲皮苷。渣提采用HPLC法对两种甜叶菊废渣提取物中的取物主要成分进行定量分析。高效液相色谱条件为：AgilentEclipsePlusC18色谱柱（50mm×2.1mm，两种1.8μm），甜叶流动相为0.1%甲酸（A）和甲醇（B），菊废流速0.1mL/min。渣提洗脱程序：0～10min，取物10%～50%（B）；10～12min，50%～10%（B）；12～15min，10%（B）。检测波长320nm和360nm，柱温30℃，进样量1μL。采用咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、槲皮素和槲皮苷为标准品，按上述色谱条件分别测定。以标准品的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制HPLC标准曲线，并测定两种甜叶菊废渣提取物中各主要成分的含量，通过与标准品出峰时间相比较，从甜叶菊废渣提取物中分离并检测到了6种酚酸（320nm）和2种黄酮（360nm），如图1所示。采用外标法对上述8种主要成分含量进行测定，结果见表2。样品1中总酚酸的含量为（472.01±2.28）mg/g，总黄酮的含量为（75.27±1.37）mg/g，其中含量最高的3种成分依次为异绿原酸C（158.91±1.00）mg/g、异绿原酸B（116.39±0.57）mg/g和咖啡酸（105.67±0.37）mg/g。样品2中总酚酸的含量为（424.41±5.01）mg/g，总黄酮的含量为（46.4±2.36）mg/g，其中含量最高的3种成分依次为咖啡酸（146.47±1.68）mg/g、异绿原酸C（88.73±1.05）mg/g和异绿原酸B（67.38±0.82）mg/g。从结果中看出，两种甜叶菊废渣提取物都富含酚酸和黄酮类化合物，其中，样品1中酚酸和黄酮类化合物的总量均大于样品2，且两种样品各组成成分含量之间也存在差异，样品1绿原酸类化合物含量较多，样品2咖啡酸含量较多。这些成分具有多种生物活性，如清除自由基，抗氧化，抗炎症，抗衰老等。因此对甜叶菊废渣提取物进行研究，可为其进一步开发应用提供依据。
 

2、两种甜叶菊废渣提取物对D-半乳糖致衰老小鼠血清抗氧化指标的影响

由图2可知，D-半乳糖组小鼠的血清SOD和GPx活力明显低于正常组（P＜0.05），MDA含量明显高于正常对照组（P＜0.05），表明经D-半乳糖诱导，小鼠血清内的抗氧化活性下降，脂质过氧化物明显增多。两种甜叶菊废渣提取物低剂量组小鼠血清SOD和GPx活力，MDA含量与D-半乳糖组相比均无显著性差异（P＞0.05）；两种甜叶菊废渣提取物的中剂量组小鼠血清GPx活力较D-半乳糖组分别显著增加了16.39%和11.88%（P＜0.05），而小鼠血清SOD活力和MDA含量与D-半乳糖组相比均无显著性差异（P＞0.05）；两种甜叶菊废渣提取物高剂量组能够使D-半乳糖处理的小鼠血清SOD和GPx活力升高，MDA含量降低，其中样品1高剂量组SOD和GPx活力分别显著增加10.32%和21.67%（P＜0.05），MDA含量降低了24.5%（P＜0.05），样品2高剂量组SOD和GPx活力分别显著增加11.28%和17.42%，MDA含量降低了24.8%（P＜0.05）。两种甜叶菊废渣提取物之间相比，对D-半乳糖处理小鼠血清抗氧化指标（SOD，GPx和MDA）的影响无显著性差异（P＞0.05）。综合以上结果表明，两种甜叶菊废渣提取物有助于D半乳糖诱导衰老小鼠清除血清脂质过氧化物，提高血清抗氧化酶活力，增强机体免疫系统的能力。

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